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        缓冲液的选择与计算
        发布时间:2018-12-26   点击次数:82次
              缓冲液通常是由「弱酸及其共轭碱」或「弱碱及其共轭酸」缓冲对所组成的溶液,能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中较=较常用的一种缓冲液PBS为例,是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对,在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。
          缓冲液的选择与计算:
          为了保证缓冲液有足够强的缓冲能力,在配制缓冲液时,需要做到:
          1)为使共轭酸碱对的浓度比接近于1,应根据所需要维持的pH范围选择合适的缓冲对,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH,例如,生物培养液中需用PH=7.0的缓冲液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以选择的合适的缓冲对。如若配制PH=9.0的缓冲液,则可选择NH3·H2O-NH4Cl缓冲对(pKa(NH4+)=9.25)。可见弱酸的Ka是选择缓冲液的主要依据。
          缓冲液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,苯酚在碱性介质及铁氰化钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时较为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。
          在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲液的作用机理,当所配制和使用的缓冲液与规定的数值不相符时,为使缓冲液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。

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